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細胞株購買后是否需要離心置換出DMSO?

原載自:www.51geci.net[行情動態(tài)]  2025-01-13  瀏覽次數(shù):324

  在細胞生物學研究中,細胞株的保存與復蘇是實驗成功的關(guān)鍵步驟之一。二甲基亞砜(DMSO)作為一種常用的冷凍保護劑,在細胞凍存過程中發(fā)揮著重要作用。然而,當從商業(yè)供應(yīng)商處進行細胞株購買時,這些細胞通常被儲存在含有DMSO的冷凍介質(zhì)中。那么在開始培養(yǎng)之前,是否有必要通過離心來去除DMSO呢?
  一、DMSO的作用與潛在影響
  DMSO能夠降低冰點,減少細胞內(nèi)冰晶形成,從而保護細胞免受冷凍傷害。但是,高濃度的DMSO對某些類型的細胞可能具有毒性作用,尤其是在復蘇后的初期階段。此外,DMSO也可能干擾后續(xù)實驗的結(jié)果,比如影響藥物篩選測試或基因表達分析等。
  二、何時考慮移除DMSO?
  1.特定類型的細胞:對于一些特別敏感的細胞系,如干細胞或原代細胞,建議在復蘇后盡快移除DMSO。
  2.長期培養(yǎng)計劃:如果計劃將細胞長時間維持在培養(yǎng)狀態(tài)而不立即使用,則應(yīng)盡可能早地去除DMSO,以減少其潛在的負面影響。
  3.后續(xù)實驗需求:根據(jù)即將進行的實驗類型決定是否需要移除DMSO。如在進行流式細胞術(shù)或其他需要高度純凈細胞懸液的技術(shù)前,最好先清除掉殘留的DMSO。
  三、如何安全有效地移除DMSO?
  1.溫和離心:將含有細胞的冷凍管置于37℃水浴中快速解凍,然后轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的離心管中,輕輕混勻后以低速(約200-300 g)離心5分鐘。
  2.洗滌步驟:棄去上清液,加入預熱至室溫的PBS緩沖液重懸沉淀物,再次離心清洗一次。
  3.轉(zhuǎn)移至新容器:最后一次離心后,用適量全培養(yǎng)基重新懸浮細胞,并轉(zhuǎn)移到預先準備好的培養(yǎng)瓶或孔板中繼續(xù)培養(yǎng)。
  四、注意事項
  1.整個過程中動作要輕柔,避免劇烈震蕩導致細胞損傷。
  2.確保所有操作都在無菌條件下完成,以防污染。
  3.根據(jù)具體情況調(diào)整離心速度和時間,不同種類的細胞對機械應(yīng)力的耐受程度不同。
  雖然不是所有情況下都必須去除DMSO,但考慮到其可能帶來的不利影響,特別是對于那些對環(huán)境變化較為敏感或者用于特定目的的細胞株來說,采取適當?shù)拇胧﹣頊p少甚至消除DMSO的存在是非常值得推薦的。通過上述方法,我們可以更加靈活地控制實驗條件,提高研究效率和準確性。

 

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